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細胞/腦片膜片鉗系統

腦片/組織片膜片鉗記錄系統試驗配置

 

      腦片/組織片膜片記錄分析系統是以腦片或組織的切片為試驗材料,研究其細胞膜上離子通道的電流的變化規律。一整套的腦片/組織切片膜片鉗記錄分析系統主要包括:

 

(1)膜片鉗信號放大器:為膜片鉗記錄系統的核心,其特殊的電路設計能保障對微小通道電流的精確記錄,TeoLinc代理的德國HEKA EPC-10系列放大器擁有1/2/3/4四種通道,客戶可根據需要選擇不同通道的放大器。

 

(2)數模轉換器:用于對模擬信號和數碼信號進行轉換。德國HEKA的數模轉換器是和信號放大器整合在一起的,減少了在記錄過程中的噪音。

 

(3)采集與分析軟件:用于采集并分析通道信號。德國KEKA的采集軟件是PatecMaster,分析軟件是FitMaster是經典的膜片鉗采集與分析軟件包。

 

(4)正置顯微鏡:目前我國市場上的膜片鉗試驗常用的顯微鏡品牌主要有日本的Olympus、Nikon、德國的Leica、Zeiss等。

 

(5)顯微操縱器:微操縱器是膜片鉗試驗所必須的,用于調節記錄微電極的位置使之與細胞形成封接,或調節給藥電極、注射電極的位置,用于給細胞施加藥物或向細胞內注射物質。常見的品牌有美國Sutter、英國MCI、美國SD等。

 

(6)微電極拉制/針儀:用于制備各種玻璃微電極。有多種類型,常見的有兩種:一種為垂直型微電極拉制儀,通過加熱的金屬絲(鎢絲或鉑絲)將玻璃毛坯加熱到熔點,利用重力拉斷毛坯,如美國Sutter公司的P-30,日本Narishige(成茂)公司的P-10;另一種是水平程控微電極拉制儀,通過微電腦程序設置拉制參數,利用電動拉力作單次或多次拉制,拉制的電極形狀多種多樣。加熱裝置有的是用金屬絲(片)、鎢鈦合金、鎳鎘合金,有的是用激光,后一種可以拉制石英玻璃電極。如美國Sutter公司的P-97/P-1000/P-2000等。

 

(7)拋光儀/磨針儀:微電極拉制儀拉制出的電極,電極的尖端往往不是很光滑。為了能與細胞膜間形成穩定可靠的封接,一般拉制出的微電極需要對其尖端進行拋光處理,尤其是進行單通道記錄時的微電極更需要進行拋

光,此時需要使用拋光儀。單通道記錄中還需要在微電極尖端涂上疏水性硅酮樹脂(Sylgard)以減小跨壁電容帶來的噪聲。

 

(8)灌流給藥系統:研究離子通道通常是研究在一定的刺激條件下離子通道的電流變化及其變化規律,藥物的

刺激或觀察藥物的作用是基本的實驗方法,依據實驗目的和實驗材料的不同,選用合適的給藥系統是非常重要。常見的品牌有美國ALA、美國Warner等。

 

(9)溫度控制儀:在膜片鉗試驗中,常常需要將細胞、腦片/組織片保持在一個相對恒溫系統中,以保持標本活性,這就需要有溫度控制儀。常見的有美國Warner公司生產的TC-324B、TC-344B等。

 

(10)腦片/組織片切片機:在腦片/組織片膜片鉗試驗中,常需要將腦片/組織片切成100-400um左右的薄片,腦片/組織片切片機就是為了制備高活性腦片或組織片的設備。常見的有英國Campden公司的5000mz和7000mz。

 

(11)刺激隔離系統:用于對腦片或組織片施加細胞外刺激,包括刺激器和隔離器。主要產品有美國A-M System公司的Model 2100型、以色列AMPI公司的Master-8型等多通道刺激器。

 

(12)腦片/組織片孵育槽:在腦片/組織片實驗中,需要將切好的標本需要放置在具有一定的pH值與滲透壓,同時還要通入氧氣與二氧化碳的混合氣體(一般為95%O2+%CO2)并維持一定溫度的營養液中。這就需要腦片/組織片孵育槽。常見的有美國Warner公司生產的BPC-PC型腦片/組織片孵育槽。

 

(13)細胞記錄槽:腦片/組織片灌流槽是放置標本的浴槽,根據標本以及試驗目的的不同,其對細胞記錄槽的要求也不同,美國Warner公司生產的RC系列細胞記錄槽能滿足各種試驗需求。

 

(14)蠕動泵:用于將液體灌流給標本,維持標本的營養,保證其活性。常見品牌有中國保定蘭格公司、美國Harvard公司等。

 

(15)防震臺與靜電屏蔽網:在膜片鉗試驗中,需要在一段時間內保持記錄電極尖端與細胞膜封接狀態,而震動極易使封接斷開,從而導致試驗失敗,所以需要使用防震臺來避免這情況。同時也需要用靜電屏蔽網來防止雜

電場對試驗數據采集的影響。美國TMC公司的65-544型系列防震臺和TeoLinc靜電屏蔽網結合來保障試驗順利進行。

 

(16)顯微鏡X-Y移動臺與支撐平臺:顯微鏡X-Y移動平臺用于腦片/組織片膜片鉗記錄試驗中移動顯微鏡,便于實驗標本的操作。生產廠家有美國Sutter公司和中國TeoLinc公司,能與所有顯微鏡匹配。

 

(17)儀器架:用于放置膜片鉗試驗儀器。主要以國內廠家為主,如TeoLinc。

 

(18)計算機:用于采集、存儲與分析數據。各大品牌的計算機均可。

 

(19) 其他:如監視系統、附件包等。

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